对于紫外可见分光光度计,你了解多少?
紫外可见分光光度计的用途之一是物质的鉴定,主要是用来测量待测的未知或者已知的物质对可见光的吸光度,并且同时的进行定量分析。用途之二是进行待测物质和标准物及标准图谱对照的分析。用途之三是用来比较某种物质比较大的吸收波长吸收系数一致性。用途之四是进行物质的纯度检验。紫外可见分光光度计的用途之五是用来推测化合物的分子结构以及其构成等。用途之六是判定络合物的组成测定。
A.紫外可见分光光度计的原理:
紫外可见分光光度计的工作原理:基于朗伯-比耳(Lambert-Beer)定律,即物质在一定浓度下的吸光度与它的吸收介质的厚度呈正比。
通常表述为:当一束平行的单色光通过某一均匀的有色溶液时,溶液的吸光度与溶液的浓度和光程的乘积成正比,其数学表达式如下:
A=-lg( It/I0 )= - lgT= =εbC
式中,A 为吸光度;I0为入射的单色光强度;It为透射的单色光强度;T为物质的透射率;ε为摩尔吸光系数(L·mol-1·cm-1);b为被吸收层厚度(cm),即比色皿的光程;C为物质的摩尔浓度(mol·L-1);
B.紫外可见分光光度计常见应用:
紫外可见分光光度计广泛应用于制药、医疗卫生、化工、能源、机械、冶金、环保、地质、食品、生物、材料、农业、林业、渔业等行业,在高等教育、计量科学和科研院所中的教学、科研领域,以及生产中的质量控制,原材料和产品检验等各方面发挥着重要作用,是理化实验室常用的分析仪器。
C.紫外可见分光光度计的光谱范围:
常见的紫外可见分光光度计的波长范围为190-1100 nm。通常所指的可见光谱范围为400-700 nm,是指被人眼能感知到的光谱范围,200-400 nm为紫外光谱范围。一般,在可见区测试的样品必须是有色物质。
D.紫外可见分光光度计具体应用如下:
1)核酸、蛋白浓度测量以及细菌生长浓度测量。
2)食品、水质、合金等样品中的金属元素(如铁、锰、镉、铜、铝等)及非金属元素(如硅、磷/磷酸盐、硝酸盐、硫酸盐、氟化物等)分析。
3)与其他分析仪器联用,并进行定性分析,如有机化合物的分析、药物分析。常见的 分析手段如:与标准物及标准图谱对照;比较大吸收波长吸收系数的一致性。
E.紫外可见分光光度计的使用方法:
1)溶液装入比色皿约2/3高度处为宜;尽量避免气泡的产生;若溶液残留在比色皿外壁,应及时擦拭干净(先用滤纸吸干,然后用擦镜纸轻拭光面);对于易挥发的样品,建议使用比色皿盖;尽量避免沾污样品架,否则应及时擦去样品架上残留液体。
2)比色皿使用完毕应及时清洗,并用适当的方法清洗,若清洗不当或没有清洗干净,也会影响测量结果的准确度和稳定性。
3)测试过程中,若某一光源不用,可选择将其关闭,以延长灯的使用寿命;仪器不用时,请及时关机、并拔掉电源插头,以防止雷雨天气可能造成的损坏。
4)请勿擅自拆卸仪器外壳和内部零部件,尤其是光路结构部分,切勿随意松动其紧固螺钉和螺母;请勿随意触碰各光学表面(包括光源),以免影响仪器的正常工作、甚至造成人为损坏。
5)保持仪器表面和工作环境的清洁;杜绝使用汽油、乙mi等有机溶液擦拭仪器外壳;仪器不用时可用防尘罩进行防护。
6)紫外可见分光光度计应避免长期不用,建议定期开机确保其能正常运转;温、湿度较高的地区应特别注意防潮。